| 產(chǎn)品名稱 |
人羊膜上皮細(xì)胞 |
| 商品貨號 |
MZ-4220 |
| 組織來源 |
人羊膜組織，于原代凍存 |
| 規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 細(xì)胞描述 |
人羊膜是由上皮細(xì)胞層，基底膜和無血管基質(zhì)組成。羊膜上皮細(xì)胞是在受精后的第8天由外胚層形成。由于其為胚胎來源，羊膜上皮細(xì)胞缺少主要的組織相容性抗原，這點(diǎn)已用于異基因移植來治療病人的溶酶體疾病。研究表明，羊膜上皮細(xì)胞具有多種功能，例如：合成和釋放乙酰膽堿和兒茶酚胺，同時，表達(dá)編碼多巴胺受體和多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的信使RNA。它們表達(dá)神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)記物并形成基本的纖維母細(xì)胞生長因子，肝細(xì)胞生長因子和β轉(zhuǎn)運(yùn)生長因子。人類羊膜上皮細(xì)胞被認(rèn)為是研究多巴胺釋放和攝取過程、受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和開發(fā)作用于這些受體的新藥物的合適的人的細(xì)胞模型。 |
| 細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
| 細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
